Topmusicanswers
Laraskan suhu penyepuhlindapan, kerana kepekatan tinggi aditif PCR atau pelarut bersama melemahkan pengikat primer ke sasaran. Tingkatkan jumlah DNA polimerase, atau gunakan DNA polimerase dengan proses yang tinggi.
...
- Kesalahan urutan pada termini produk PCR.
- Penguatan positif palsu.
- Sumber.
- Apakah penyelesaian masalah biasa yang boleh berlaku dalam PCR?
- Mengapa PCR saya tidak berfungsi?
- Apa yang menyebabkan PCR memburuk?
- Apa yang berlaku sekiranya suhu penyepuhlindapan terlalu tinggi?
Apakah penyelesaian masalah biasa yang boleh berlaku dalam PCR?
Panduan penyelesaian masalah PCR
| Masalah | Punca |
|---|---|
| Hasil produk PCR rendah atau tidak ada | Suhu penyepuhlindapan dan penyambungan Thermocycler tidak optimum |
| Tindak balas tiada polimerase Taq atau komponen tindak balas lain | |
| Kepekatan primer terlalu rendah | |
| Urutan sasaran tidak ada dalam templat DNA |
Mengapa PCR saya tidak berfungsi?
Melupakan hanya satu komponen reaksi PCR, sama ada DNA polimerase, primer atau bahkan DNA templat, akan menghasilkan reaksi yang gagal. Penyelesaian paling mudah adalah mengulangi tindak balas. ... Sekiranya masih belum ada produk PCR setelah ini, kemungkinan ada perkara lain yang menghalang reaksi anda.
Apa yang menyebabkan PCR memburuk?
Pencemaran DNA, RNA dalam sampel DNA, kepekatan DNA yang tinggi dalam tindak balas PCR boleh menyebabkan smear. ... Pemburuan DNA biasanya disebabkan oleh tanaman kerana kepekatan DNA templat yang tinggi.
Apa yang berlaku sekiranya suhu penyepuhlindapan terlalu tinggi?
Suhu penyaduran terlalu tinggi
Sekiranya suhu penyepuhlindapan terlalu tinggi, primer tidak dapat mengikat pada templat. Peraturan praktisnya ialah menggunakan suhu penyepuhlindapan yang 5 ° C lebih rendah daripada Tm dari buku asas.
